Electroforeza proteinelor
Această procedură separă proteinele din ser și fluidele corporale (de exemplu, lichid peritoneal, urină) în albumină și globuline componente. Electroforeza este indicată pentru determinarea naturii subiacente a unei hiperglobulinemie sau dacă la un pacient este suspectat mielom multiplu. Tipurile de imunoglobuline care cuprind o hiperglobulinemie pot oferi informații utile de diagnostic. Este mai puțin util pentru evaluarea imunodeficiențelor; cuantificarea individuală a imunoglobulinei oferă mai multe informații în aceste tulburări. Se utilizeaza electroforeza capilară pentru electroforeza proteinelor noastre. Aceasta este o tehnică foarte sensibilă și împarte proteinele în mai multe fracții, care sunt dependente de specie. Pentru simplitatea raportării, nu raportăm rezultatele pentru fracții individuale, ci cele pentru fracții combinate, de ex. albumină, a1, a2, total a, b1, b2, total b și g.
Componente de electroforeză
Electroforetograma împarte fracția proteică a serului sau plasmei în componentele sale constitutive, care includ albumina și globulinele. Există trei fracții de globulină: alfa, beta și gamma.
Proteine totale
Aceasta se măsoară pe Modular P folosind metoda biuretului (ser, plasmă, fluide corporale) sau turbidometrie (CSF, urină). O concentrație totală de proteine este necesară pentru a furniza valori absolute (nu doar procente) ale componentelor proteice.
Albumină
Albumina este primul vârf de pe electroforetogramă și este de obicei un vârf înalt și subțire. Concentrația de albumină din ELP este de obicei mai mică decât cea de la Modular P.
Alfa (a) globuline
Acestea migrează alături de albumină și sunt sintetizate în ficat. Acestea includ proteinele reactante de fază acută, macroglobulina a-2 și haptoglobulina. La majoritatea speciilor, a-globulinele pot fi împărțite în două componente principale, a1 și a2, deși sunt prezente subdiviziuni suplimentare la unele specii sau animale individuale.
Beta (b) globuline
Acestea migrează între g- și a-globuline. Acestea sunt de obicei produse în ficat și includ componente de fibrinogen (plasmă), transferină și complement. La fel ca a-globulinele, b-globulinele pot fi împărțite în două componente majore (b1 și b2) la majoritatea speciilor, deși sunt evidente subdiviziuni suplimentare (de exemplu, câinii au de obicei b1a și b1b).
Gamma (g) globuline
Acesta cuprinde imunoglobulinele, IgG, IgA și IgM și este cel mai îndepărtat vârf de albumină. În realitate, IgA și IgM migrează adesea în regiunea b târzie (regiunea b2) sau în regiunea g timpurie. Forma vârfului g oferă informații de diagnostic. Un vârf cu bază largă indică o gamapatie policlonală (vezi panoul B de mai jos), care se datorează de obicei stimulării antigenice și nu este specifică bolii. Un vârf înalt și ascuțit în regiunea g sau în regiunea b târzie este compatibil cu o gamapatie monoclonală. Picurile monoclonale sunt de obicei datorate unor tulburări neoplazice, de ex. mielom multiplu, limfom cu celule B sau leucemie limfocitară cronică cu celule B. În cazuri rare, bolile inflamatorii sau infecțioase se pot prezenta cu un vârf gamma îngust, care poate fi dificil de distins de o adevărată gammapatie monoclonală neoplazică. Aceasta este denumită mai corect o gamapatie „oligoclonală restrânsă” și a fost raportată în diferite boli, cum ar fi Ehrlichia, Leishmania, FIV, FIP și alte boli.
Electroforeza proteinelor serice
Serul este proba preferată pentru electroforeză. Fibrinogenul (în probele heparinizate) produce un vârf monoclonal în regiunea b, care afectează interpretarea în probele de plasmă. Ne-am stabilit propriile intervale de referință pentru câini, pisici, cai, vite și alpaca. Prin urmare, rezultatele anormale la aceste specii vor fi semnalate. În plus, oferim întotdeauna scanarea electroforetogramă în sine, nu doar raportul scris.
Electroforeza proteinelor fluidelor corporale
Electroforeza poate fi efectuată pe fluide corporale, cum ar fi lichidul peritoneal. Acest lucru se face de obicei la pisicile cu revărsat abdominal pentru a susține diagnosticul de infecție cu virusul peritonitei infecțioase feline. În această tulburare se poate dezvolta un revărsat exsudativ în abdomen. Caracteristicile electroforetice ale fluidului sunt similare cu rezultatele serice, deoarece revărsatul se datorează unei vasculite. Prin urmare, serul și lichidul trebuie supuse concomitent pentru electroforeză. Ambele prezintă de obicei o creștere a globulinelor a (răspuns în fază acută) și o gamapatie policlonală (creștere generală a globulinelor g). O creștere a g-globulinelor în lichid este sugestivă pentru infecția cu FIPV (vezi imaginea de mai jos). Electroforeza poate fi efectuată și pe probe de LCR, dar aceasta nu se face în mod obișnuit, deoarece sunt necesare volume mari de LCR. Proteina din LCR este de obicei prea scăzută pentru a rula pe ELP fără concentrare. Avem nevoie de minimum 600 mg/dL de proteine pentru a efectua electroforeza. Concentrarea LCR necesită cel puțin 5 până la 10 ml de lichid, care nu poate fi obținut de la multe animale.
Electroforeza proteinelor urinare
Electroforeza poate fi efectuată pe urină, dar similar cu LCR, aceasta necesită concentrare deoarece valorile proteinelor sunt de obicei destul de scăzute în urină (avem nevoie de minim 600 mg/dL de proteine pentru a efectua electroforeza). Din fericire, putem obține suficientă urină (minimum 10 ml) de la majoritatea animalelor pentru a efectua electroforeza. Electroforeza pe urină este tehnica preferată pentru identificarea proteinelor Bence Jones la pacienții cu suspiciune de mielom multiplu. Ar trebui să se facă întotdeauna împreună cu serul, astfel încât rezultatele să poată fi comparate direct. Alte persoane au efectuat electroforeza urinară pentru a distinge între hemoglobinurie și mioglobinurie (cu toate acestea, distincția este subiectivă și plină de complicații) și pentru a obține o perspectivă asupra mecanismelor proteinuriei.
Sursa: vet.cornell.edu